Čimbenici koji utječu na učinak uklanjanja virusa
Čimbenici koji utječu na učinak uklanjanja virusa
Filtriranje za uklanjanje virusa može značajno ukloniti viruse u otopinama, a njegov učinak uklanjanja povezan je s mjestom gdje se odvija filtracija za uklanjanje virusa, koncentracijom proteina u tekućini za punjenje, tlakom filtracije, vremenom skladištenja i krioprezervacije itd.
1. Gdje se odvija filtracija za uklanjanje virusa
Filtracija za uklanjanje virusa može se dogoditi bilo gdje u nizvodnom pročišćavanju, ali obično se odvija nakon inaktivacije virusa s niskim pH, srednjih kromatografskih koraka ili završnih kromatografskih koraka. Sveukupno, tijekom nizvodnog procesa, stvarni zahtjevi filtracije uvelike ovise o tome gdje se u procesu nalazi korak filtracije virusa, jer koncentracija proteina, čistoća i procesni volumeni mogu varirati.
2. Koncentracija proteina u hranidnoj tekućini
Koncentracija proteina u uzorku utjecat će na tok filtracije za uklanjanje virusa kroz interakciju između otopine za punjenje i membranske vrećice. Veća koncentracija proteina smanjit će brzinu procesa filtracije za uklanjanje virusa. To je također povezano sa svojstvima samog proteina i same membrane. Obično se koncentracija proizvoda smanjuje tijekom kontinuiranog razrjeđivanja proizvoda kako bi se povećao kapacitet i brzina protoka membrane filtra za uklanjanje virusa.
3. Tlak filtracije
Proces filtracije za uklanjanje virusa općenito treba osigurati kontinuiranu filtraciju. Budući da prekid pritiska može dovesti do prodora virusa. Načelo je sljedeće: konvekcijski učinak dovodne tekućine koja teče kroz filtar uzrokuje da čestice virusa budu zarobljene na površini membrane ili zarobljene u manjim porama zbog isključenja veličine molekula. Kada tlak padne, brzina protoka i učinak konvekcije se smanjuju. Virus će pobjeći i osloboditi se iz malih pora, i difundirati u velike pore s velikom vjerojatnošću da će prodrijeti.
4. Vrijeme skladištenja i krioprezervacija
Neki proteini stvaraju agregate tijekom procesa skladištenja, posebno tijekom krioprezervacije. Ovi agregati mogu utjecati na filtraciju za uklanjanje virusa. Stoga je potrebno procijeniti postoji li dugo razdoblje skladištenja u procesu proizvodnje ili kada je potrebna krioprezervacija.
