Odgovori na profesionalna pitanja ultrafiltracijske centrifugalne cijevi

1. Koji je membranski materijal ultrafiltracijske cijevi?

Polieterulfonska membrana ima jasno i točno presretanje molekularne težine, stabilna fizička i kemijska svojstva, ekstremno nisku adsorpciju proteina i visoku oporabu proizvoda

2. Ako treba odvojiti proteine s različitim molekularnim težinama, koliku razliku treba molekularna težina proteina?

Dva proteina moraju biti 10 puta ili više različitih veličina

3. Može li se ultrafiltracijska cijev centrifuge koristiti za koncentraciju virusa?

Ultrafiltracijska cijev centrifuge može koncentrirati virus mnogo puta ili čak visokih vremena. Imamo posebnu membranu za virus. Različiti virusi moraju odabrati odgovarajuću veličinu membranskih pora

4. Može li se ultrafiltracijska cijev centrifuge dezinficirati i otporna na lužine?

Može se dezinficirati 75% vodenom otopinom etanola. Naš materijal može izdržati 0,1-0,5n alkalnog pranja natrijevog hidroksida

5. Može li se ultrafiltracijska cijev centrifuge koristiti za sterilizaciju pod visokim tlakom

Imamo posebnu ultrafiltracijsku cijev centrifuge pogodnu za sterilizaciju pod visokim tlakom

6. S obzirom na stabilnost proteina, može li se ultrafiltracijska cijev centrifirati na niskoj temperaturi?

Da, naš materijal je otporan na nisku temperaturu, ali vrijeme koncentracije će biti duže. Brzina filtracije membrane povezana je s temperaturom tekućine za napajanje

7. O stopi oporavka

Općenito, stopa oporavka otopljenih tvari s koncentracijom većom od 0,1 mg/ml iznosi 90% ili više. Općenito, gubitak uzoraka uzrokovan je nespecifičnom adsorpcijom na površini membrane filtra i površini materijalne cijevi. Kako bi se dobila visoka stopa oporavka, zadržana molekularna težina odabrane membrane filtra je oko 1 / 3 ciljnog proteina, ultrafiltracijska membrana je asimetrična membrana, veličina pora se normalno raspoređuje i može curiti pod centrifugalnim visokim tlakom. Pod tim uvjetima, proteinska tekućina može se deformirati, Stoga, što je manji otvor presretanja, to je sporija brzina protoka, ali će stopa oporavka biti veća

8. Kada je protein koncentriran, dolazi do oborina. Kako se nositi s tim?

Ako je protein koncentriran prebrzo ili previše, može uzrokovati oborine proteina. Konačna koncentracija nakon koncentracije proteina ne smije biti previsoka; Za proteine koji su osjetljivi na brzinu koncentracije i lako se talože, predložene metode poboljšanja su sljedeće:

1) Smanjite centrifugalnu brzinu,

2) Koristite ultrafiltracijsku membranu veće molekularne težine

3) Puhati i sisati koncentracijsku cijev, a zatim centrifugirati

9. Koji su mogući razlozi zašto se ultrafiltracijska cijev centrifuge ne može centrifugirati prema dolje?

Ako se ultrafiltracijska cijev ne može centrifugirati, početna centrifugacija može se provesti s oko 20% vodenom otopinom etanola, jer nakon što se ultrafiltracijska membrana potpuno osuši, površina membrane je slabo hidrofobna, a fluks se može obnoviti nakon namakanja s otapalom niske površinske napetosti

10. Pravilna uporaba i očuvanje ultrafiltracijske cijevi

Ultrafiltracijska cijev u početku se centrifugira pročišćenom vodom prije uporabe kako bi se provjerila njezina cjelovitost. Nakon svake uporabe potrebno ga je pohraniti u mokrom stanju kako bi se spriječilo sušenje membrane

11. Kako ukloniti endotoksin iz ultrafiltracijske cijevi?

Ultrafiltracijska cijev koju smo osigurali nije tretirana endotoksinom. Istodobno, zbog raširenog postojanja endotoksina u prirodi, uzorci koji zahtijevaju unutarnje toksine mogu se prethodno očistiti s 0,5N natrijevim hidroksidom prije eksperimenta, a zatim očistiti RO vodom kako bi se uklonio veći dio endotoksina

12. Kada se koncentrirani protein analizira nizvodno, utvrđeno je da postoji smetnja. Koji je razlog?

Ultrafiltracijska cijev može se prethodno očistiti puferom ili pročišćenom vodom. Ako smetnje još uvijek postoje, očistite ga s 0,1N natrijevog hidroksida, a zatim ga očistite pročišćenom vodom

13. U procesu koncentracije može postojati nespecifična adsorpcija između ciljnog proteina i ultrafiltracijske membrane. Kako ga poboljšati?

Koristimo hidrofilnu polieterulfonsku membranu, ali za neke proteine s posebnim svojstvima može se poboljšati njihova nespecifična adsorpcija s membranom. U tom slučaju možemo pokušati prethodno obraditi ultrafiltracijsku cijev prije eksperimenta ili kontaktirati našeg inženjera

14. Nakon koncentracije, utvrđeno je da u koncentratu nema ciljnog proteina. Koji su mogući razlozi?

1) Početna koncentracija proteina ne smije biti preniska. Ako je koncentracija preniska, membrana se možda neće zadržati

2) Odaberite odgovarajuću veličinu membranskih pora. Centrifugacija i koncentracija ultrafiltracijske cijevi pripada filtraciji slijepe ulice. Veličina membranskih pora općenito je manja od 2 puta ili više od ciljnog proteina

3) Odaberite odgovarajuću centrifugalnu brzinu

4) Da li se ciljni protein taloži