CM kromatografija slabe ionske-izmjenjivačke membrane

SP jaka kationska izmjenjivačka membranska kromatografija proizvoda Uvod 

 

2. Prednosti proizvoda

Brzo i učinkovito Visok kapacitet vezivanja može se postići pri brzinama protoka do 40 puta bržim od tradicionalne kromatografije na smoli. U usporedbi s konvencionalnom kromatografijom na bazi- smole, vrijeme procesa pomoću membranske kromatografije može se smanjiti za 30-40 puta. Tipična radna brzina protoka je oko 10 MV/min.

2.2 Visoka učinkovitost vezivanja Membranska kromatografija pokazuje visok kapacitet vezivanja i velike brzine protoka pri niskom padu tlaka, što omogućuje hvatanje nabijenih biomolekula u jednom prolazu kroz modul.

2.3 Skalabilan i fleksibilan Cijeli raspon proizvoda za membransku kromatografiju može zadovoljiti različite potrebe pročišćavanja biomolekula, pokrivajući primjene od razvoja procesa do -velike proizvodnje. Dizajn kapsule omogućuje jednokratnu-uporabu ili se može očistiti i ponovno upotrijebiti nakon odgovarajućih postupaka čišćenja.

2.4 Poboljšana produktivnost Kompaktan dizajn minimalizira prostor koji zauzima prostor. Eliminacijom operacija kao što su pakiranje kolone, čišćenje, provjera valjanosti čišćenja i skladištenje kolone, obrada može započeti nakon jednostavnog uspostavljanja ravnoteže s relativno manje pufera. Budući da nema potrebe za pakiranjem kolone, čišćenjem ili skladištenjem, troškovi rada mogu se smanjiti za više od 50%.

 

 

3 Tehnički parametri

3.1 Strukturni materijali

	Laboratorijska ljestvica	mala razmjera	pilot skala	opseg proizvodnje
volumen membrane	0,2 ml	5 ml	140 ml	5L
Membranska potporna struktura	Polipropilen
membransko kućište	Polipropilen
O prsten	Silikon

3.2 Radne karakteristike

	Laboratorijska ljestvica	mala razmjera	pilot skala	opseg proizvodnje
volumen membrane	0,2 ml	5 ml	400 ml	5L
Preporučeni protok	1-6 ml/min	25-150 ml/min	2-12L/min	25-150L/min
Maksimalna radna temperatura	35 stupnjeva
Maksimalni radni tlak	3 bara (25 stupnjeva)
Maksimalna razlika tlaka	3 bara (25 stupnjeva)
Uvjeti skladištenja	20% etanolaupitnasrješenje

Usporedba pokazuje da je životni vijek SP membranske kromatografije usporediv s vijekom trajanja SP Sepharose 6FF.

Slika 1. Promjene kapaciteta vezanja SP membranske kromatografije nakon višestruke uporabe testirane lizozimom

Dodatno smo procijenili učinkovitost membranske kromatografije u uklanjanju proteina stanica domaćina i nukleinskih kiselina. Rezultati su sljedeći:

	DNK				HCP
	IgG oporavak	Sadržaj (pg/mg IgG) pomoću RT PCR		Faktor uklanjanja	Sadržaj (ng/mg IgG) prema Elisi		Faktor uklanjanja
Trčanje	%	Prije Q membrane	Nakon Q membrane	Dnevnik	Prije Q membrane	Nakon Q membrane	Dnevnik
1	96.4	423	3.6	2.07	7	4.3	0.21
2	97.4	438	4.3	2.01	7	4.7	0.17
3	94.1	513	5.8	1.95	6	2.3	0.42
4	96.2	32	0.8	1.60	6	3.2	0.27
5	96.3	45	1.9	1.37	8	3.4	0.37
6	96.7	158	2.4	1.82	8	3.5	0.36
7	96.4	267	2.6	2.01	9	6	0.18
8	96.8	298	3.6	1.92	9	7	0.11
9	97.9	746	9.8	1.88	4	1.5	0.43
10	96.2	39	3.2	1.09	4	1.4	0.46

Tablica 1. Stope uklanjanja DNA i proteina stanice domaćina u CHO-eksprimiranom IgG materijalu korištenjem SP membranske kromatografije

Niz eksperimenata pokazao je da SP membranska kromatografija može učinkovito ukloniti kontaminante uz održavanje visoke stope oporavka ciljnog IgG.

Kada se uspoređuje Gudiling SP membranska kromatografija s uvezenim markama, podaci o kapacitetu vezanja su sljedeći:

Uvezivanjeckapacitet (mg/mL)	Sartorius	PALL	vođenje
Lizozim	25	32	29
tripsin	22	27	25

Tablica 2. Izvedba kapaciteta vezanja različitih proteina u našim proizvodima i konkurentskim markama

Ukupna procjena pokazuje da je naš kapacitet vezivanja usporediv s kapacitetom uvezenih proizvoda.

Slika 2. Ispitivanje kapaciteta vezanja SP membranskog kromatografskog modula korištenjem lizozima kao standarda

U usporedbi s dinamičkim kapacitetom vezanja i uvezenim proizvodima, potvrđeno je da se većina ciljnih proteina može uhvatiti kada se lizozim eluira u 190 mM NaCl.

Kroz različite uvjete elucije, otkrili smo da su profili elucije membranske kromatografije slični onima u agaroznom gelu, ali čistoća proteina značajno varira pri različitim koncentracijama soli. U stvarnom istraživanju i razvoju i proizvodnji, potrebno je kvantitativno odrediti optimalne uvjete eluiranja kako bi se dobili ciljni proteini visoke -čistoće.

 

4 tipična slučaja primjene

Uklanjanje DNA, virusa i proteina stanice domaćina

Hvatanje plazmida, virusa, proteina i pročišćavanje oligonukleotida

Uklanjanje pigmenata iz bujona za fermentaciju kvasca i visoko{0}}hvatanje proteina

 

5 Postupak korištenja

5.1 Priprema i montaža opreme:

5.1.1: Instalirajte modul membranske kromatografije na ÄKTA kromatografski sustav slijedeći postupke slične kolonama smole, osiguravajući da smjer protoka bude poravnat sa strelicama modula i ulaznom orijentacijom. Za sigurnu integraciju u sustav povežite modul koristeći Luerove brave ili stezaljke-.

5.1.2 Postavite brzinu protoka hrane na5–10 MV/mini otplinite modul pomoću pufera za ravnotežu, osiguravajući da u efluentu nema mjehurića zraka. Nakon otplinjavanja spojite izlaz permeata na kromatografski sustav.

5.2: Tretman prije-uporabe:

5.2.1:

Postavite brzinu protoka hrane na5–10 MV/mini obavite pred{0}}tretman0,5 M NaOH za više od 5 MV, osiguravajući da membrana postigne punu ravnotežu.

5.2.2: Pri istoj brzini protoka, izvršite pred-tretman s1 M NaCl za više od 5 MVkako bi se osiguralo da membrana postigne punu ravnotežu.

5.3 Kromatografski postupak

5.3.1 Postavite brzinu protoka napajanja na 5-10 MV/min i uravnotežite membranu puferom za ekvilibraciju više od 5 MV, dok membrana ne postigne punu ravnotežu.

5.3.2 Nakon pred-filtracije od 0,22 μm, stavite uzorak na membranu dok se ne završi punjenje uzorka ili dok se ne postigne kromatografski kapacitet vezivanja.

5.3.3 Isperite puferom za uravnoteženje više od 10 MV dok se UV signal ne vrati na osnovnu liniju.

5.3.4 Primijenite gradijentnu eluciju ili postupnu eluciju u skladu s dizajnom procesa i prema potrebi prikupite frakcije.

5.4 CIP tretman nakon-uporabe – uređaj za membransku kromatografiju CIP (čišćenje na mjestu)

5.4.1 Postavite brzinu protoka dovoda na 5–10 MV/min i provedite čišćenje s 1 M NaOH za više od 10 MV, dok se UV signal ne smanji ispod osnovne linije.

5.4.2 Nakon cirkulacije od 30 minuta, prijeđite na ispiranje vodom dok pH ne dosegne 7-8, zatim nastavite s čišćenjem s 20% etanolom dok vodljivost ne postane gotovo konstantna.

5.5 Skladištenje membranske kromatografije

Nakon upotrebe i završetka CIP-a, membranski modul može se ukloniti i pohraniti namakanjem u 20% etanola ili se može pohraniti u -liniji na sobnoj temperaturi u otopini koja sadrži 20% etanola. Otopinu 20% etanola treba povremeno pregledati i zamijeniti.

 

6. Podaci o naručivanju

Q jaki filtar kapsule s membranom za kromatografiju anionske izmjene

	Laboratorijska ljestvica	mala razmjera	pilot skala	opseg proizvodnje
Model proizvoda	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
Volumen membrane	0,2 ml	5 ml	400 ml	5L

Popularni tagovi: cm slaba ion{0}}membranska kromatografija, Kina, dobavljači, proizvođači, tvornica, veleprodaja, rasuto, na zalihama, besplatni uzorak