Q jaka anionska membranska kromatografija

 

2. Prednosti proizvoda

2.1 Brzo i učinkovito - postiže visoku sposobnost vezivanja pri protoku do 40 puta bržem od tradicionalnih smola. U usporedbi s -kromatografijom u punjenom sloju, vrijeme procesa pomoću membranske kromatografije smanjeno je 30-40 puta. Tipična radna brzina protoka je 10 MV/min.

2.2 Visoka učinkovitost vezivanja - membranska kromatografija pokazuje veliki kapacitet punjenja i velike brzine protoka u uvjetima niskog pada tlaka, što omogućuje hvatanje nabijenih biomolekula u jednom prolazu.

2.3 Skalabilan i fleksibilan - cijeli niz proizvoda za membransku kromatografiju može zadovoljiti različite potrebe pročišćavanja biomakromolekula, pokrivajući sve faze od razvoja procesa do -velike proizvodnje. Strukturni dizajn tipa-kapsule podržava rad za jednokratnu-upotrebu i ponovnu upotrebu nakon čišćenja.

2.4 Poboljšajte produktivnost - Kompaktan dizajn minimalizira prostor koji zauzima prostor. Eliminiranjem operacija pakiranja kolone, čišćenja, validacije čišćenja i skladištenja kolone, proces zahtijeva manje pufera za ekvilibraciju i može se izvesti izravno bez pripreme kolone. Troškovi rada mogu se smanjiti do 50%.

 

3. Tehnički parametar

3.1 Strukturni materijal

	Laboratorijska ljestvica	mala razmjera	pilot skala	opseg proizvodnje
volumen membrane	0,2 ml	5 ml	140 ml	5L
Potporna struktura membrane:	polipropilen (PP)
membransko kućište	polipropilen (PP)
O prsten	silikon

 

3.2 Radne karakteristike

	Laboratorijska ljestvica	mala razmjera	pilot skala	opseg proizvodnje
volumen membrane	0,2 ml	5 ml	400 ml	5L
Preporučeni protok	1-6 ml/min	25-150 ml/min	2-12L/min	25-150L/min
Maksimalna radna temperatura	35 stupnjeva
Maksimalni radni tlak	3 bara (25 stupnjeva)
Maksimalna razlika tlaka	3 bara (25 stupnjeva)
Uvjeti skladištenja:	20% vodena otopina etanola

 

Životni vijek Q membranske kromatografije usporediv je s vijekom trajanja kromatografije na agaroznom gelu.

 

 

Slika 1. Promjene u kapacitetu punjenja membranske kromatografije nakon višestrukih uporaba koje prati BSA

Dodatno, procijenili smo učinkovitost uklanjanja membranske kromatografije za proteine ​​stanica domaćina i nukleinske kiseline. Rezultati su sljedeći.

	DNK				HCP
	IgG oporavak	Sadržaj (pg/mg IgG) pomoću RT PCR		Faktor uklanjanja	Sadržaj (ng/mg IgG) prema Elisi		Faktor uklanjanja
Trčanje	%	Prije Q membrane	Nakon Q membrane	Dnevnik	Prije Q membrane	Nakon Q membrane	Dnevnik
1	96.7	423	1.2	2.55	7	4.8	0.16
2	97.4	438	1.3	2.53	7	4.9	0.15
3	94.7	513	1.3	2.60	6	1.9	0.50
4	95	32	0.9	1.55	6	4.2	0.15
5	96.3	45	1.1	1.61	8	5.2	0.19
6	96.5	158	0.7	2.35	8	6.2	0.11
7	96.4	267	1.9	2.15	9	7.2	0.10
8	96.8	298	2.3	2.11	9	8.2	0.04
9	97.1	746	1.5	2.70	4	2	0.30
10	96.6	39	1	1.59	4	1.5	0.43

Tablica 1. Stope uklanjanja DNK i proteina stanice domaćina u CHO-eksprimiranom IgG materijalu korištenjem Q membranske kromatografije

 

Niz eksperimenata pokazao je da Q membranska kromatografija može učinkovito ukloniti nečistoće uz održavanje visokog ciljanog povrata IgG.

Osim toga, usporedili smo Gudiling membransku kromatografiju s uvoznim markama, a podaci o kapacitetu punjenja su sljedeći:

Kapacitet punjenja (mg/ml)	Sartorius	PALL	vođenje
BSA	29	60	45
TRAVNJAK	25	40	35
Protein A	27	45	40
tripsin	30	56	44

Tablica 2. Učinak punjenja različitih proteina na našem proizvodu i proizvodima konkurencije

Ukupna procjena pokazuje da je naš kapacitet utovara usporediv s uvezenim proizvodima,

Slika 2.Korištenjem Q membranskog kromatografskog modula, BSA je korišten kao standardni protein za procjenu kapaciteta vezanja. Dinamička sposobnost vezivanja uspoređena je s onom uvezenih proizvoda. Rezultati su pokazali da se većina ciljnog proteina može uhvatiti i isprati s njim150 mM NaClkada se koristi BSA kao model proteina.

Kroz različite uvjete elucije, otkrili smo da je ponašanje elucije membranske kromatografije slično onome kod kromatografije na agaroznom gelu. Čistoća proteina eluiranih pri različitim koncentracijama soli značajno varira. U stvarnom razvoju procesa i proizvodnji, potrebno je kvantitativno odrediti optimalne uvjete eluiranja kako bi se dobio ciljni protein visoke čistoće.

 

4．Tipični slučaj primjene

Uklanjanje DNA, virusa, proteina stanice domaćina (HCP) i endotoksina

Hvatanje plazmida, virusa i proteina, kao i pročišćavanje oligonukleotida

 

5. Radni postupak

5.1: Priprema i sastavljanje opreme:

5.1.1: AKTA kromatografski sustav: Instalirajte modul membranske kromatografije na način sličan napunjenim kolonama. Provjerite je li smjer strelice na modulu u skladu sa smjerom protoka hrane. Spojite sustav pomoću Luer konektora ili Tri-Clamp spojnica.

5.1.2 Postavite ulazni protok na 5–10 MV/min i koristite međuspremnik za ravnotežu za uklanjanje zraka iz sustava. Nakon što se uvjerite da u izlaznoj struji nema mjehurića zraka, spojite izlaz permeata na kromatografski sustav.

5.2: Tretman prije-uporabe:

5.2.1:

Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >5 MV kako bi se osiguralo da membrana postigne ravnotežu.

5.2.2:

At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >5 MV kako bi se osiguralo da membrana postigne ravnotežu.

5.3 Kromatografski postupak

5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >5 MV dok membrana ne postigne ravnotežu.

5.3.2 Nakon što se uzorak prethodno -filtrira kroz filtar od 0,22 μm, nanesite ga na kolonu dok se ne nanese cijeli uzorak ili dok se ne postigne kromatografski kapacitet vezanja.

5.3.3 Flush with equilibration buffer at >10 MV dok UV signal ne padne na osnovnu liniju.

5.3.4 Provedite gradijentnu ili linearnu eluciju prema osmišljenom protokolu i po potrebi prikupite frakcije.

5.4 CIP tretman nakon-uporabe – uređaj za membransku kromatografiju CIP

5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >10 MV dok UV signal ne padne ispod osnovne linije.

5.4.2 Nakon cirkulacije od 30 minuta, prijeđite na ispiranje vodom dok pH ne dosegne 7-8, a zatim prijeđite na 20% etanol i nastavite ispiranje dok se vodljivost ne stabilizira.

5.5, Skladištenje membranske kromatografije:

Nakon upotrebe i završetka CIP-a, membranski modul se može rastaviti i pohraniti u 20% etanolu ili držati online na sobnoj temperaturi u 20% etanolu. Otopinu etanola treba povremeno zamijeniti i pregledati.

 

6. Informacije o naručivanju

Q Strong Anion-Exchange Membrane Kromatography Capsule Filter

	Laboratorijska ljestvica	mala razmjera	pilot skala	opseg proizvodnje
Model proizvoda	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
volumen membrane	0,2 ml	5 ml	400 ml	5L

Popularni tagovi: q jaka anionska membranska kromatografija, Kina, dobavljači, proizvođači, tvornica, veleprodaja, rasuto, na zalihama, besplatni uzorak